蛋白酶K(Proteinase K)，LK-7037

产品简介

名称：蛋白酶K（Proteinase K）  

纯度：不含DNase/RNase，可直接使用（无需预处理）。  

酶活力：>30U/mg（单位定义：37℃、pH 7.5下，每分钟水解酪蛋白生成1 μmol酪氨酸为1U）。

产品规格

液体（20mg/ml）：1ml;5ml;10ml 干粉：100mg；500mg；1g 

产品用途

核酸分离：降解核酸结合蛋白，去除内毒素对阳离子蛋白（如溶菌酶）的干扰。

抗原修复：石蜡切片中暴露抗原表位（免疫组化）。

朊病毒研究：消化脑组织蛋白，研究传染性海绵状脑病（TSE）。

酶学特性

有效pH范围： pH 4.0-12.5（最佳pH 7.5-8.0）                                           

最佳反应温度：65℃（但高温下酶易自降解，推荐工作温度50-55℃）。

增强剂：0.2-1% SDS 或 10mM尿素可显著提高酶活性。                                    

耐受性：耐受EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍等常见试剂（对活力影响小）。

工作浓度与实验条件

常用工作浓度：0.05-1 mg/mL（需根据以下因素调整）：  

缓冲液成分：含SDS/尿素时可降低用量。  

pH与温度：偏离最佳条件（pH 7.5-8.0，50-55℃）需增加浓度。  

典型应用举例：  

  基因组DNA抽提：常用0.1-0.5 mg/mL（含0.5% SDS的裂解缓冲液，50℃孵育1-2小时）。  

  蛋白消化：0.05-0.2 mg/mL（温和条件下去除酶污染）。  

操作注意事项

1. 避免反复冻融：建议分装保存（如50μL/管），-20℃长期储存，使用前冰上溶解。  

2. 安全防护：穿戴实验服、手套（防止皮肤接触引发过敏）。  

3. 自降解风险：65℃以上长时间孵育会导致酶快速失活，需严格控制温度。  

常见问题解决方案

Q1：如何确定最佳工作浓度？  

  A：先以0.1 mg/mL起始，根据消化效果调整（如消化不完全可增至0.5 mg/mL）。  

Q2：含SDS的样本如何处理？  

  A：直接加入蛋白酶K（SDS增强活性），无需额外稀释。  

Q3：酶活性下降的可能原因？  

  A：反复冻融或高温存放导致，建议分装并使用新鲜解冻批次。  

应用场景示例

核酸提取：降解组蛋白、灭活核酸酶，提高DNA/RNA纯度。  

组织消化：软化组织样本（如石蜡切片抗原修复）。  

去除内毒素：释放被结合的阳离子蛋白（如溶菌酶）。  

附：简易操作流程（以DNA提取为例）

1. 取100μL样本（含0.5% SDS），加入蛋白酶K至终浓度0.2 mg/mL。  

2. 55℃孵育1小时（或37℃过夜）。  

3. 后续进行酚氯仿抽提或柱纯化步骤。