DPBF荧光探针,LK-1920
产品介绍
1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF,CAS号:5471-63-6)是一种高选择性荧光探针,专门用于检测和定量测定含有不同活性氮氧物种(RNOS)样品中的过氧化氢。DPBF分子式为C₂₀H₁₄O,分子量270.33 g/mol,外观为黄色至橙色结晶粉末。
近20年来,DPBF一直被认为对某些活性氧物种(如单线态氧、羟基、烷氧基或烷过氧自由基)具有高度特异性反应。最新研究表明,DPBF在特定条件下对过氧化氢检测表现出优异的选择性和灵敏度。
产品特点
1.高选择性:在复杂生物体系中可特异性检测过氧化氢
2.灵敏度高:检测限可达微摩尔级别
3.操作简便:荧光信号变化明显,易于观测
4.稳定性好:适当保存条件下可长期保持活性
5.应用广泛:适用于细胞、组织等多种样本检测
实验方法(仅供参考)
工作液配制
1.储存液制备:
1.1用DMSO配制10 mM的DPBF储存液(如:3.7 mL DMSO溶解10 mg DPBF)
1.2分装后于-20°C或-80°C避光保存
1.3避免反复冻融
2 工作液配制:
2.1使用前用预热好的无血清细胞培养基或PBS稀释储存液
2.2推荐工作浓度10-20uM
2.3现用现配
细胞染色步骤
1.细胞准备:
悬浮细胞:离心收集,PBS洗涤两次(每次5分钟)
贴壁细胞:弃去培养基,胰蛋白酶消化,离心弃上清,PBS洗涤两次(每次5分钟)
注:非流式实验可不消化处理
2.染色过程:
加入1 mL DPBF工作液;室温孵育30分钟;400 g,4°C离心3-4分钟,弃上清(贴壁细胞非流式实验直接去除染色液即可);PBS洗涤两次(每次5分钟);1 mL无血清培养基或PBS重悬细胞。
3.检测:
1 荧光显微镜观察
2 或流式细胞仪检测
注意事项
1.储存条件:储存液分装后-20°C或-80°C避光保存;避免反复冻融;工作液现配现用。
2.实验操作:全程避光操作;根据实验体系优化工作浓度;严格控制孵育时间和温度。
3.安全须知:穿实验服,戴一次性手套操作;避免直接接触皮肤和眼睛;废液按有机有害废物处理。
4.应用限制:仅限科研使用;;不得用于临床诊断或治疗;不得用于食品或药品