溶酶体红色荧光探针,LK-3370

产品介绍  

本产品是一种高选择性、高灵敏度的红色荧光探针，可特异性标记活细胞或固定细胞中的溶酶体（lysosome）。该探针具有良好的细胞膜通透性和低毒性，适用于活细胞成像、溶酶体动态追踪及药物作用机制研究。  

规格：50ul（1 mM in DMSO）   

产品特点  

高特异性：选择性靶向溶酶体，荧光信号与溶酶体酸性环境（pH 4.5–5.5）相关。  

强荧光信号：激发波长（Ex）≈575 nm，发射波长（Em）≈594 nm，适用于常规荧光显微镜、共聚焦显微镜及流式细胞仪检测。  

低细胞毒性：适用于长时间活细胞成像（<24 h）。  

兼容性广：可与绿色溶酶体探针（如 LysoTracker Green）联合使用，进行多色标记。  

使用方法(仅供参考） 

工作液配制  

1. 取出探针（1 mM in DMSO），室温避光解冻，短暂离心。  

2. 用无血清培养基（如 PBS 或 HBSS）稀释至 50–200 nM（推荐起始浓度 100 nM）。  

  （注：最佳浓度需根据细胞类型优化，过高浓度可能导致非特异性染色。）

细胞染色步骤  

（适用于贴壁细胞或悬浮细胞）  

1. 细胞准备：将细胞接种于培养皿/玻片，待细胞密度达 60–80% 时进行染色。  

2. 染色：吸除原培养基，加入预温（37℃）的探针工作液（1 mL/35 mm 培养皿）。  

37℃ 避光孵育 30–60 min（时间可优化，通常 30 min 即可）。  

3. 洗涤：用预温 PBS 或 HBSS 洗涤 2–3 次，去除未结合的探针。  

4. 成像：直接观察（活细胞）或用 4% 多聚甲醛固定后观察（固定细胞）。荧光显微镜设置：Ex 575nm / Em 585-600nm（红色通道）。  

流式细胞术检测  

1. 按上述方法染色后，用胰酶消化收集细胞。  

2. PBS 洗涤 2 次，重悬于 PBS 中。  

3. 上机检测（Ex 575 nm / Em 594 nm，与AlexFlour 594近似）。  

注意事项  

1.避免光照：探针见光易降解，操作全程需避光（使用铝箔包裹或关闭室内灯光）。  

2.优化浓度：不同细胞系对探针摄取效率不同，建议先梯度测试（50–500 nM）。  

3.控制孵育时间：过长孵育（>2 h）可能导致溶酶体过度标记或细胞毒性。  

4.避免反复冻融：建议分装保存，每次使用后迅速放回 -20℃。  

5.多色实验兼容性：若同时使用其他溶酶体探针（如 LysoTracker Red），需确认光谱无重叠。  

常见问题解答  

Q1：探针染色后荧光信号弱？  

- 可能原因：① 探针浓度过低；② 孵育时间不足；③ 细胞溶酶体数量少（可先用溶酶体诱导剂如 Bafilomycin A1 预处理）。  

Q2：出现非特异性染色？  

- 可能原因：① 探针浓度过高；② 细胞状态差（凋亡/坏死细胞易非特异性摄取）。建议降低浓度或更换新鲜细胞。  

Q3：能否用于组织切片？  

- 可以，但需优化渗透条件（如 0.1% Triton X-100 处理 5 min）。  

产品保存
储存条件：-20℃ 避光保存，避免反复冻融  ，有效期：12 个月

产品声明
1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.我公司所有产品仅限科学研究实验使用，严禁其他用途，因用于其他用途引起的人身财产安全事故，本公司概不负责。

3.由于科研实验本身存在不确定性和失败风险，对于珍贵样本务必谨慎使用，或者使用前请用普通样本做预实验，确保实验条件和方案成熟，以免对珍贵样本造成不可挽回的浪费和其他实验损失。产品如遇质量问题，售后仅限产品本身，不涉及连带其他任何赔偿。

4.介于科研实验的样本类型复杂性，实验因素多样性，本产品提供的产品说明书仅供参考，如所需实验与本说明书提供的实验信息不一致，请自行查阅文献。