动物骨髓中性粒细胞分离液试剂盒,LK-69026
产品介绍
本试剂盒专为从各种动物骨髓中分离中性粒细胞而设计,采用密度梯度离心原理,可高效分离高纯度的中性粒细胞。试剂盒包含全套分离所需组分,操作简便,适用于科研实验中的细胞分离需求。
产品特点
- 高纯度分离:通过优化密度梯度,实现中性粒细胞的高效分离
- 操作简便:配套完整试剂,无需额外配制
- 通用性强:适用于多种动物骨髓样本
- 稳定性好:室温避光保存,保质期长达2年
产品规格
- 规格:200 mL/kit
- 保存条件:室温(18-25℃)避光保存
- 保质期:2年
试剂盒组成
分离液A:200mL 室温避光
分离液C:100mL 室温避光
细胞洗涤液:200mL 室温
红细胞裂解液:100mL 室温
全血及组织稀释液:200mL 室温
产品使用方法(仅供参考)
骨髓单细胞悬液制备
小动物骨髓采集:
1. 处死动物,无菌提取股骨和胫骨,剪去两端软骨
2. 用含10%胎牛血清的稀释液冲洗骨髓腔
3. 制备2×10⁸-1×10⁹/mL的单细胞悬液
大动物骨髓采集:
1. 麻醉动物,消毒穿刺部位
2. 使用骨髓穿刺针抽取骨髓
3. 用含10%胎牛血清的稀释液调整细胞浓度
中性粒细胞分离步骤
1. 在离心管中依次加入4mL分离液A和2mL分离液C,形成梯度界面
2. 将细胞悬液平铺于分离液上方,保持界面清晰
3. 室温下500-1000g离心20-30分钟
4. 离心后收集下层中性粒细胞层
5. 用细胞洗涤液洗涤细胞(250g,离心10分钟)
6. 重复洗涤步骤一次
7. 细胞重悬备用
注意事项
1. 使用前请颠倒混匀分离液,并在无菌条件下操作
2. 分离过程应保持室温(18-25℃),低温可能导致红细胞污染加重
3. 洗涤细胞时不可使用含Ca²⁺、Mg²⁺的缓冲液
4. 避免使用带静电的塑料制品,以防细胞挂壁
5. 如需细胞培养,全程需保持无菌操作
6. 离心力不得超过1200g,以免影响分离效果
7. 不同动物种属可能需要调整分离条件
参考文献
1. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 1968
2. Ting A, Morris PJ. A technique for lymphocyte preparation from stored heparinized blood. Vox Sang. 1971
3. Weisbart RH, et al. A simplified method for lymphocyte separation. Vox Sang. 1972
产品声明
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