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超微量发光底物(低飞克ECL液),LK-6363
产品介绍
超微量发光底物(低飞克ECL液)是一种基于增强化学发光(Enhanced Chemiluminescence, ECL)技术的高灵敏度检测试剂,专为Western Blot等免疫检测实验设计。本产品采用优化的发光底物配方,能够检测低至飞克(femtogram)级别的目标蛋白,显著提高了检测的灵敏度和信噪比,特别适用于低丰度蛋白的检测。
产品特点
1. 超高灵敏度:可检测低至飞克级别的蛋白,比常规ECL试剂灵敏度提高10-100倍
2. 超长信号持续时间:发光信号稳定持久,可达24小时以上
3. 低背景噪音:优化的配方大幅降低非特异性信号
4. 宽线性范围:可同时检测强弱不同的信号,避免过饱和
5. 兼容性强:适用于各种膜材料(PVDF、NC膜等)和检测系统
6. 即用型配方:A液和B液按比例混合后可直接使用,操作简便
产品使用方法
标准操作流程
1. 准备工作:
- 将试剂A和B从4℃取出,室温平衡15分钟
- 准备洁净的避光容器用于混合工作液
2. 配制工作液:
- 按1:1比例混合试剂A和B(如1mL A液 + 1mL B液)
- 轻柔混匀,避免产生气泡
- 工作液配制后应在2小时内使用
3. 孵育步骤:
- 将膜从洗涤缓冲液中取出,用滤纸吸去多余液体
- 将工作液均匀覆盖在膜上,孵育10秒-1分钟(可以直接放入成像系统再加入发光液)
4. 信号检测:
- 用镊子将膜转移至成像系统
- 根据信号强度调整曝光时间(建议从1秒开始尝试)
- 可进行多次曝光以获得最佳图像
注意事项
1. 安全防护:
- 操作时请佩戴手套和护目镜
- 避免皮肤直接接触试剂
- 如不慎接触,立即用大量清水冲洗
2. 操作注意事项:
- 工作液配制应在避光条件下进行
- 避免反复冻融试剂
- 不同批次试剂请勿混用
- 使用前确保膜完全湿润
3. 信号优化建议:
- 对于强信号:缩短曝光时间(0.1秒-3秒)
- 对于弱信号:延长曝光时间(1-3分钟)
4. 废液处理:
- 废液应按照实验室化学废物处理规范处置
- 不可直接倒入下水道
常见问题解答
Q1:为什么我的信号很弱?
A:可能原因包括:
- 一抗/二抗效价不足
- 蛋白上样量过低
- 膜未完全湿润导致底物分布不均
- 工作液配制比例错误
- 孵育时间不足
Q2:为什么背景很高?
A:可能原因包括:
- 一抗/二抗浓度过高
- 封闭不充分
- 洗涤不彻底
- 膜干燥过
- 工作液配制后放置时间过长
Q3:信号持续时间很短怎么办?
A:建议:
- 确保工作液新鲜配制
- 检查试剂保存条件是否合适
- 可尝试增加底物孵育时间
- 使用质量更好的膜材料
Q4:可以重复使用工作液吗?
A:不建议。工作液应现配现用,重复使用会导致灵敏度下降和背景升高。
Q5:如何延长发光信号?
A:可以:
- 孵育后将膜密封在避光袋中
- 4℃保存已孵育的膜
- 使用信号增强剂(如有配套产品)
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。