DyLight 488 山羊抗兔 IgG (H+L)，LK-7519

产品介绍  

DyLight 488 山羊抗兔 IgG (H+L) 是一种高灵敏度的荧光标记二抗，专为免疫荧光（IF）、流式细胞术（Flow Cytometry）等实验设计。该抗体由高质量的山羊抗兔 IgG (H+L) 与 DyLight 488 荧光染料共价偶联而成，具有高荧光强度和优异的光稳定性，适用于多种荧光检测系统（如 488 nm 激光激发，发射波长约 520 nm）。  

DyLight 488 是一种绿色荧光染料，相较于传统 FITC，其光稳定性更强，背景更低，特别适用于长时间成像和高分辨率显微观察。  

产品特点  

1.高特异性：针对兔源 IgG 的 H+L 链，与多种兔源一抗兼容。  

2.强荧光信号：DyLight 488 荧光染料提供高信噪比，适用于低丰度蛋白检测。  

3.优异的光稳定性：比 FITC 更耐光漂白，适合长时间成像。  

4.广泛适用性：可用于免疫荧光（IF）、流式细胞术（Flow Cytometry）等实验。  

5.低交叉反应性：经过严格吸附处理，减少与非靶标蛋白的结合。  

使用方法（参考）  

1. 推荐实验条件  

- 稀释比例：通常建议 1:100–1:1000 稀释（具体比例需优化）。  

- 缓冲液：可使用 PBS、TBS 或含 1% BSA/5% 脱脂牛奶的封闭液稀释。  

- 孵育时间：室温避光孵育 1 小时，或 4℃ 孵育过夜（建议优化）。  

- 洗涤：实验后使用 PBS 或 TBS（含 0.05% Tween-20）洗涤 3 次，每次 5 分钟。  

2. 实验流程示例（免疫荧光）  

（1.） 样本固定：使用 4% 多聚甲醛固定细胞或组织切片。  

（2.） 透化（可选）：0.1% Triton X-100 处理 10 分钟（仅用于胞内抗原）。  

（3.） 封闭：5% BSA 或正常血清封闭 30 分钟。  

（4.）一抗孵育：兔源一抗 4℃ 过夜或室温 1 小时。  

（5.）二抗孵育：DyLight 488 山羊抗兔 IgG (H+L) 避光孵育 1 小时。  

（6.） 洗涤：PBS 洗涤 3 次。  

（7.） 封片观察：抗荧光淬灭封片剂封片，荧光显微镜观察。  

注意事项  

1.避光操作：DyLight 488 对光敏感，实验全程需避光（使用铝箔纸包裹）。  

2.避免反复冻融：建议分装保存，避免抗体效价下降。  

3.优化实验条件：不同样本可能需要调整抗体稀释比例和孵育时间。  

4.对照设置：建议设置阴性对照（不加一抗）以评估背景信号。  

5.储存条件：-20℃ 避光保存，避免置于 -80℃ 长期保存（可能影响荧光染料稳定性）。  

常见问题解答  

Q1: 为什么荧光信号弱？  

- 可能原因：  

  - 一抗浓度过低或结合能力差。  

  - 二抗稀释比例过高，建议优化稀释比例。  

  - 样本固定过度导致抗原表位遮蔽。  

  - 荧光淬灭（长时间光照或封片剂不合适）。  

Q2: 背景过高怎么办？  

- 可能原因：  

  - 封闭不充分，建议延长封闭时间或更换封闭剂（如 5% BSA）。  

  - 二抗浓度过高，建议降低稀释比例。  

  - 洗涤不彻底，增加洗涤次数或延长洗涤时间。  

Q3: 能否用于多重荧光染色？  

- 可以，DyLight 488 的发射波长（~520 nm）适合与红色（如 Cy3/DyLight 550）或远红荧光染料（如 Cy5/DyLight 650）搭配使用，但需注意光谱重叠，选择合适的滤光片。  

Q4: 能否用于石蜡切片？  

- 可以，但需进行抗原修复（如热修复或酶修复）以提高抗体结合效率。  

Q5: 抗体有效期多久？  

- 在 -20℃ 避光保存条件下，有效期为 1 年，避免反复冻融。  

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供科学研究使用，严禁用于临床诊断或治疗。