5×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液（含SDS），LK-6974

产品介绍  

本产品是用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的缓冲液，为5倍浓缩液。主要成分为Tris（三羟甲基氨基甲烷）、甘氨酸和SDS（十二烷基硫酸钠）。

使用时需用去离子水或双蒸水稀释至1×工作液。该缓冲液系统基于经典的Laemmli体系，能够在电泳过程中维持稳定的pH值，并提供导电介质。SDS使蛋白质带负电荷并保持线性结构，甘氨酸作为 trailing ion（尾随离子），在浓缩胶中形成不连续的pH梯度，从而实现蛋白质样品的浓缩和有效分离。  

产品特点  

1.  即用型浓缩液： 无需称量粉末，操作简便快捷，节省实验时间。

2.  经典配方： 遵循标准的Tris-Glycine体系，兼容市面上大多数垂直电泳槽和预制胶。

3.  稳定性高： 室温保存，不易沉淀或变质。

4.  清晰的分离效果： 保证蛋白条带平整、清晰，无“笑脸”或拖尾现象  

使用方法（仅供参考）  

1. 准备工作

   实验器材：电泳槽、制胶架、电源、移液器等。

   试剂：去离子水或双蒸水、待测蛋白样品、蛋白Marker、预制胶或自配凝胶。

   注意事项：若本产品在低温保存或运输过程中出现结晶或沉淀，请于37℃水浴中温育并摇晃溶解，恢复至室温后使用，不影响性能。

2. 配制1×工作液

   计算用量： 根据电泳槽所需缓冲液总量（V_total）计算。

       ( V_{5times Buffer} = V_{total} / 5 )

       ( V_{ddH2O} = V_{total} - V_{5times Buffer} )

   稀释： 量取所需体积的5×浓缩液，加入4倍体积的去离子水。

       示例：配制1000mL 1×工作液，需取200mL 5×浓缩液 + 800mL 去离子水。

   混匀： 轻微搅拌或颠倒混匀。建议现用现配，稀释后的1×工作液不宜长期保存。

3. 电泳操作

1.  将配制好的凝胶（预制胶或自制胶）安装入电泳槽中。

2.  在内槽（阴极槽）倒满新鲜配制的1×电泳缓冲液，并检查是否漏液。

3.  在外槽（阳极槽）倒入适量的1×电泳缓冲液（通常至刻度线）。

4.  小心拔掉梳子，用移液器吸取缓冲液冲洗加样孔，去除气泡和未聚合的凝胶碎片。

5.  按预定顺序加入蛋白Marker和处理好的蛋白样品。

6.  盖上电泳槽盖子（注意正负极，红对红，黑对黑），连接电源。

7.  电泳条件（参考）：

       浓缩胶：恒压 80V，约 20-30 分钟（样品进入分离胶并压成一条线）。

       分离胶：恒压 120V-150V，约 40-60 分钟（直至溴酚蓝指示剂到达凝胶底部）。

8.  电泳结束后，关闭电源，取出凝胶进行后续的转膜或染色操作。

注意事项  

1.  安全提示： 本产品含有的SDS为温和刺激物，操作时请穿戴实验服和手套，避免皮肤直接接触或溅入眼内。若不慎接触，请用大量清水冲洗。

2.  浓缩液使用： 5×浓缩液在低温（如4℃或冬季室温较低）下可能会出现白色沉淀（SDS析出），这是正常现象。请务必37℃水浴加热溶解并充分摇匀后再稀释使用，否则浓度不准会影响电泳效果。

3.  水质要求： 稀释时必须使用去离子水或双蒸水，避免使用自来水，以免水中的杂质离子影响电导率和pH值，导致电泳速度变慢或产热过高。

4.  重复利用： 建议内槽（阴极）使用新鲜缓冲液以保证分离效果；外槽（阳极）缓冲液可重复使用1-2次，但若发现电流异常或条带扭曲，请勿重复使用。

5.  废弃物处理： 用过的缓冲液可按照普通化学废水排放，具体请遵循所在机构的废弃物处理规定。  

常见问题解答  

Q1：为什么我的5×缓冲液里有白色絮状物？

A1：这是最常见的现象，主要因为溶液中的SDS在低温下析出。只需将瓶子置于37℃水浴或室温（若室温较高）放置一段时间，期间偶尔摇晃，直至沉淀完全溶解即可。

Q2：电泳时条带跑得很慢，或者电流很低，是什么原因？

A2：

   可能是稀释倍数不准确（比如误将5倍当1倍用，或者加水过多）。

   可能是浓缩液未溶解充分（SDS析出导致有效浓度降低）。

   检查电泳槽电极是否连接正确，或者缓冲液是否加得太少。

   水质问题：稀释用的水纯度不够（如含有大量离子）也可能影响导电率。

Q3：为什么蛋白条带出现“微笑”（两边翘起）或“皱眉”（中间凸起）？

A3：

   “微笑”：通常是因为电泳过程中产热过高，导致凝胶中间温度高于两边，迁移速度不均。可以尝试降低电压（如降至100V），或使用带有冷却装置的电泳槽。

   “皱眉”：通常是因为凝胶底部有气泡，或者凝胶聚合不均匀，或者缓冲液液面过低。

Q4：我可以回收并使用旧的1×缓冲液吗？

A4：内槽（上槽）缓冲液由于直接接触样品（含有SDS、未结合的染料、甘油等），建议不要回收使用，以免影响分离效果。外槽（下槽）缓冲液如果清澈无污染，可以重复使用1-2次，但若用于高精度实验，建议全部使用新鲜缓冲液。

Q5：这个缓冲液可以用在非变性电泳（Native-PAGE）吗？

A5：不可以。本产品含有SDS，会使蛋白质变性并带上大量负电荷，掩盖其天然构象和原始电荷。进行非变性电泳请选择不含SDS的Tris-甘氨酸缓冲液。  

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。