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TE缓冲液,LK-7039
产品介绍
TE缓冲液(Tris-EDTA buffer)是分子生物学中最常用的缓冲液之一。由Tris-HCl提供稳定的pH环境(通常为pH 8.0),EDTA作为金属离子螯合剂,可抑制核酸酶活性,保护DNA或RNA不被降解。
该产品经高压灭菌处理,无DNase、RNase污染,适用于核酸样品的溶解、稀释、长期保存及部分酶促反应体系。
产品特点
- 高纯度:使用分子生物学级别原料,不含核酸酶与蛋白酶污染
- 稳定性强:Tris-HCl维持恒定pH,EDTA有效抑制核酸降解
- 兼容性好:适用于大多数DNA/RNA相关实验,不影响后续酶切、连接、PCR等反应(当稀释倍数足够时)
- 操作方便:即用型液体,无需配制或调节pH
使用方法(仅供参考)
1. 核酸溶解与保存
- 将DNA或RNA沉淀溶于适量TE缓冲液中,轻轻吹打或低速涡旋混匀。
- 短期保存(数周至数月):4°C。
- 长期保存(1年以上):-20°C 或 -80°C 分装保存,避免反复冻融。
2. 核酸稀释
- 用于酶切、连接、PCR等实验前,如需稀释高浓度核酸样品,可使用TE缓冲液作为稀释液。
注意:若后续反应对EDTA敏感(如某些金属离子依赖的酶),建议将样品稀释至EDTA终浓度低于0.1 mM,或改用Tris缓冲液或超纯水。
3. 电泳样品制备
- 将核酸样品与上样缓冲液按比例混合时,若样品已溶于TE,可直接使用;但上样量不宜过大,以免电泳槽中EDTA影响其他泳道样品迁移。
注意事项
1. 避免污染:使用时请使用无菌吸头或移液器,防止核酸酶或微生物污染。
2. 酶反应兼容性:EDTA会螯合Mg²⁺、Ca²⁺等二价阳离子,对依赖这些离子的酶(如限制性内切酶、DNA聚合酶)有抑制作用。用于酶反应体系时,确保反应体系中EDTA最终浓度≤ 0.1 mM。
3. pH一致性:确认您的实验要求与TE缓冲液的pH(通常pH 8.0)是否一致,尤其在进行特定酶切或杂交实验时。
4. 解冻后混匀:若低温保存后使用,应充分融化并颠倒混匀,避免局部浓度不均。
5. 分装保存:建议分装为小规格,避免反复开启造成污染或pH变化。
常见问题解答
1. TE缓冲液与超纯水相比,哪个更适合保存DNA?
答:TE缓冲液更优。Tris维持pH稳定,防止酸性条件下DNA脱嘌呤;EDTA抑制核酸酶活性,尤其适用于低浓度或长期保存的DNA样品。但若后续实验对EDTA敏感,则建议用超纯水或相应实验缓冲液稀释后使用。
2. TE缓冲液能否用于RNA保存?
答:可用于RNA短期保存,但若需长期保存RNA,建议使用DEPC处理过的TE缓冲液(DEPC-TE)或专用的RNA保存液,并注意防止RNase污染。
3. 为什么酶切体系中有时不推荐直接用TE稀释的DNA?
答:因为TE中的EDTA会螯合酶切反应所需的Mg²⁺,抑制酶活性。通常建议将DNA稀释至EDTA终浓度低于0.1 mM(例如将1 μL TE溶解的DNA加入50 μL反应体系中,EDTA浓度可忽略不计),或通过乙醇沉淀/纯化方式去除EDTA。
4. TE缓冲液可以反复冻融吗?
答:建议分装后避免反复冻融。反复冻融可能导致pH轻微漂移或引入污染。若仅用于溶解DNA,且冻融次数不多(<5次),一般不影响使用。
5. 出现沉淀或絮状物是否正常?
答:如果保存不当(如低温放置过久)可能出现少量絮状物,常见于EDTA在低温下溶解度降低所致。可室温放置片刻并轻轻摇匀,多数可复溶。若沉淀不溶或溶液浑浊,建议更换新批次。
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。