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  • LK-6978 WB转膜液干粉
  • LK-6978 WB转膜液干粉

    LK-6977 Western 转膜液,10x
    • 160.00
      160.00
产品描述
LK-6977 Western 转膜液,10x

WB转膜液干粉LK-6978

产品介绍  

本产品为预配制的转膜液干粉,溶于1L蒸馏水或去离子水后,即成为经典的Towbin转膜缓冲液(Tris-Glycine体系,含20%甲醇及适量SDS)。  

适用于Western Blot实验中蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)转移至PVDF膜或硝酸纤维素膜(NC膜),尤其适合较大分子量蛋白(>100 kDa) 的转膜。  

产品特点  

- 快速配制:无需称量多个组分,避免称量误差  

- 稳定性好:干粉形式,室温干燥保存,有效期长  

- 兼容性强:适用于湿转 

- 膜损伤低:缓冲能力稳定,转膜产热少

使用方法(仅供参考)  

 所需试剂(自备)

- 甲醇(分析纯或更高纯度)  

- 蒸馏水或去离子水

配制1L工作液步骤

1. 取一包转膜液干粉,倒入洁净的烧杯或量筒中。  

2. 加入约800 mL蒸馏水,搅拌或磁力搅拌至完全溶解。  

3. 加入 200 mL 甲醇,混匀。  

4. 用蒸馏水定容至1000 mL,再次混匀。  

5. 使用前建议4℃预冷(尤其湿转时,可降低产热)。

> 注意:  

> - 如进行半干转转膜,需要自行摸索实验条件,参考:甲醇可减至 1015%100150 mL),其余用水补足。  

> - 转膜液不宜回收使用,以免影响转膜效率和背景均匀性。

注意事项  

1. 甲醇有毒,配制及使用时请在通风橱中进行,戴手套、护目镜。  

2. 本产品不含甲醇,请务必自行添加,否则转膜效率极低。  

3. 对于小分子蛋白(<20 kDa),可减少SDS或添加PVPTween-20等(配方不适用时建议选用专用转膜液)。  

4. 转膜前需用甲醇激活PVDF膜(NC膜无需激活)。  

5. 干粉应密封保存于干燥阴凉处,避免受潮结块。  

6. 配制好的转膜液建议当天使用,4℃可保存12周,但效率会下降

常见问题解答  

问:转膜后蛋白完全未转移,可能是什么原因?  

答:常见原因包括忘记加甲醇,或电极方向错误。解决方法:按说明加入20%甲醇;检查正负极方向(蛋白应从负极转至正极)。

问:膜上出现不均匀背景,如何避免?  

答:通常由转膜产热过多或气泡残留引起。建议4℃预冷转膜液,并在转膜前彻底赶尽凝胶与膜之间的气泡。

问:小分子蛋白容易转穿膜,怎么办?  

答:可缩短转膜时间,或改用0.22 µm孔径的NC膜。

问:大分子蛋白转膜效率低,如何改进?  

答:可适当提高SDS0.05%;湿转时建议将甲醇浓度降至1015%

问:配制后溶液出现浑浊,正常吗?  

答:通常是因为干粉未完全溶解或水质不佳。请充分搅拌至澄清,并使用去离子水配制。

产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知

本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。