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RNA样本保存液即用型,LK-3995
产品介绍
RNA样本保存液是一种无毒的、即用型组织/细胞RNA稳定保存试剂。本产品通过高浓度盐析剂和变性剂迅速渗透组织内部,瞬间灭活内源及外源RNase(核糖核酸酶),同时稳定细胞内的RNA谱,防止基因表达谱发生变化。
本产品特别适用于无法立即进行RNA提取或液氮速冻的实验样本处理。将组织块或细胞浸没于保存液中,可在常温(25℃)下稳定保存RNA长达7天,在4℃下保存长达4周,在-20℃或-80℃下长期保存,且反复冻融不影响RNA质量。
产品特点
- 快速渗透:能迅速穿透细胞膜和组织块,即时固定RNA表达谱。
- 强力保护:高效抑制RNase活性,确保RNA分子完整性。
- 操作便捷:无需液氮、干冰或-80℃冰箱进行临时保存,简化采样流程。
- 数据准确:防止离体后基因表达变化,确保后续qPCR、RNA-seq等分析结果的真实性。
- 兼容性好:纯化后的RNA适用于RT-PCR、Northern Blot、微阵列分析、高通量测序等几乎所有下游实验。
- 安全无毒:不含汞等重金属有毒物质,操作环境更安全。
使用方法(仅供参考)
适用样本类型:动物组织、细胞沉淀、白细胞、部分植物组织。
一、组织样本保存
1. 采样前准备:根据样本大小,预先向离心管或冻存管中加入适量RNA样本保存液(通常为组织体积的5-10倍,例如50-100 mg组织需加入1 mL保存液)。
2. 组织采集:将新鲜采集的组织块(建议厚度 < 0.5 cm,以确保渗透效果)迅速浸入保存液中。确保组织完全被液体浸没,如有漂浮可用镊子压沉。
3. 保存处理:
- 短期保存:4℃过夜后,可将样本转移至-20℃或-80℃长期保存。
- 运输保存:在室温环境下,可稳定保存样本3-7天用于运输。
二、细胞样本保存
1. 悬浮细胞:离心收集细胞(通常1000-2000 rpm,5分钟),弃尽上清。向细胞沉淀中加入适量保存液(例如每10^6 - 10^7个细胞加入0.5-1 mL),轻轻吹打重悬。
2. 贴壁细胞:弃去培养液,直接用保存液冲洗细胞层并刮下细胞,或胰酶消化后按悬浮细胞方法处理。
三、RNA提取流程
1. 取出样本:从保存液中取出所需的组织块或吸取细胞悬液。
2. 去除保存液:用干净的枪头吸走残留液体(若为组织块,可用吸水纸吸干表面液体)。
3. 进行裂解:将样本转移至含有裂解液(如TRIzol、Buffer RLT等)的管中进行匀浆和后续RNA提取。注意:保存液残留可能会影响后续裂解体系的盐浓度,请尽量吸干。
注意事项
1. 操作安全:尽管本产品无毒,但仍建议佩戴实验服和手套进行操作,避免直接接触皮肤或眼睛。如不慎接触,请立即用大量清水冲洗。
2. 用量保证:保存液的体积必须足够覆盖样本(至少5倍体积)。如果保存液被样本稀释(如血液、培养液污染严重),保护效果会下降。
3. 样本厚度:对于组织块,厚度最好不超过0.5 cm。过厚的组织可能导致内部渗透不完全。
4. 兼容性:本产品仅用于保存RNA,含有高浓度盐离子。切勿直接将含有保存液的样本加入逆转录反应或PCR反应中,必须经过RNA提取纯化步骤去除保存液成分。
5. 沉淀现象:本产品在低温(如4℃或-20℃)下可能出现白色沉淀或絮状物,属于正常现象。请在使用前置于室温或37℃水浴溶解沉淀,并充分摇匀后使用,不影响性能。
6. 废弃物处理:使用过的保存液请按照化学废液处理规范进行处置。
常见问题解答
Q1:使用该保存液后,提取的RNA得率和纯度如何?
A: 本产品旨在稳定RNA,而非直接参与提取。得率和纯度主要取决于后续的RNA提取方法。只要严格按照推荐比例(组织体积的5-10倍)保存,并及时进行提取,其得率和完整性通常优于未经保护的冻存样本。Q2:保存液可以反复使用吗?
A: 不建议反复使用。一旦样本浸入,部分细胞碎片和杂质会进入保存液,反复使用会造成交叉污染并降低保存效果。处理后的保存液应废弃。
Q3:保存后的组织能否用于提取DNA或蛋白质?
A: 可以。本产品不会沉淀蛋白质,也不会剧烈破坏DNA结构。从保存液中取出的组织,在提取RNA的同时,可以裂解液保留相或组织沉淀中分别提取DNA和蛋白质(具体需参考相应试剂盒说明书)。
Q4:如果在-80℃长期保存后,需要取出一部分组织,可以反复冻融吗?
A: 可以。本产品的一大优势就是支持反复冻融。从-80℃取出样本,切下所需部分,剩余部分可以立刻放回-80℃继续保存,RNA不会因冻融循环而降解。
Q5:一些特殊的植物组织(如多糖多酚含量高)是否适用?
A: 对于大部分植物组织,该保存液可以保护RNA不被降解。但对于木质化程度极高或多糖多酚含量极其丰富的组织,保存液只能起到防降解作用,后续提取时需要配合专门的多糖多酚植物总RNA提取试剂盒。
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。