线粒体蛋白提取试剂盒，LK-E309

产品简介

线粒体是细胞的"能量工厂"，负责产生细胞所需的大部分ATP。线粒体蛋白研究对于理解细胞代谢、凋亡、信号转导等生物学过程至关重要。本试剂盒提供了一种快速、高效的方法，从哺乳动物细胞或组织中分离高纯度的线粒体蛋白，适用于蛋白质组学研究、Western blotting、酶活性分析等多种下游应用。

产品特点

1. 高纯度提取：特殊配方可有效去除细胞核和细胞质污染，获得高纯度线粒体蛋白

2. 操作简便：无需超速离心，常规离心即可完成提取过程

3. 保持活性：温和的提取条件最大程度保持线粒体蛋白的天然活性和结构完整性

4. 广泛适用性：适用于多种哺乳动物细胞系和组织样本

5. 快速高效：整个提取过程可在1小时内完成

6. 兼容性好：提取的蛋白可直接用于多种下游实验

使用方法（仅供参考）

样本准备

细胞样本：

1. 收集5×10⁶-1×10⁷个细胞，PBS洗涤两次

2. 离心(500×g, 5min, 4℃)弃上清

组织样本：

1. 取50-100mg新鲜或冷冻组织

2. 用预冷的PBS洗涤，剪碎成小块

提取步骤

1. 每1×10⁷个细胞或100mg组织加入1mL预冷的裂解液A（含蛋白酶抑制剂）

2. 冰上孵育15分钟，期间每5分钟轻轻涡旋一次

3. 4℃, 700×g离心10分钟，收集上清

4. 将上清转移至新离心管，4℃, 12,000×g离心15分钟

5. 弃上清，沉淀即为线粒体

6. 加入适量线粒体保存液C重悬线粒体沉淀

7. 进行蛋白定量后即可用于后续实验

注意事项

1. 样本处理：所有操作需在冰上或4℃进行，保持样本低温

2. 试剂准备：使用前确保所有试剂已平衡至4℃，并加入蛋白酶抑制剂

3. 离心条件：严格按照说明书要求设置离心速度和温度

4. 储存条件：提取的线粒体蛋白建议立即使用，如需保存应分装后-80℃冻存

5. 避免反复冻融：冻存样本避免多次冻融，以免影响蛋白质量

6. 安全防护：操作时穿戴实验服和手套，避免直接接触试剂

常见问题解答

Q1: 提取的线粒体蛋白纯度如何检测？

A: 建议使用Western blotting检测线粒体标志蛋白(如COX IV)和污染物标志蛋白(如GAPDH或Histone H3)。

Q2: 从组织中提取的效果不如细胞系好，可能原因是什么？

A: 组织样本需充分匀浆，可先用机械匀浆器处理后再进行提取步骤。同时确保组织新鲜或妥善保存。

Q3: 提取过程中出现大量沉淀，是否正常？

A: 少量沉淀属正常现象，如沉淀过多可能是裂解不充分或离心速度不当导致，可优化裂解时间和离心条件。

Q4: 提取的蛋白浓度偏低怎么办？

A: 可尝试增加起始样本量，或检查裂解是否充分。组织样本可延长裂解时间至20-25分钟。

Q5: 试剂盒可以用于植物或酵母样本吗？

A: 本试剂盒专为哺乳动物样本优化，不建议用于植物或酵母样本。

Q6: 提取的线粒体蛋白可以用于哪些下游实验？

A: 适用于Western blotting、2D电泳、质谱分析、酶活性测定等多种实验。

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。