Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠)，LK-6290

产品介绍  

Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠) 是一种表面共价偶联链霉亲和素（Streptavidin，SA）的超顺磁性微球。链霉亲和素与生物素（Biotin）之间具有极高的亲和力（Kd ≈ 10^-15 M），结合快速且特异性强，该结合对多种苛刻的物理化学条件（如pH、温度、变性剂、有机溶剂等）稳定。本产品利用此特性，可高效、便捷地捕获或分离任何生物素化的分子（如核酸、抗体、蛋白质、多肽等），广泛应用于分子生物学、免疫学、细胞生物学等多个研究领域。

本产品具有均一的粒径（1 μm），良好的分散性、超顺磁性及快速的磁响应性，便于在磁场作用下实现液相与固相的快速分离，显著简化操作流程，提高实验效率。

产品特点  

1.高结合能力： 对生物素分子（如生物素化核酸探针、抗体）具有优秀的结合能力。

2.卓越稳定性： 在广泛的pH、温度及缓冲液条件下保持结合活性稳定。

3.快速磁响应： 超顺磁性确保在磁场中能快速聚集，撤去磁场后易于重悬，减少损失。

4.广泛的适用性： 适应于多种实验条件和复杂的生物样本体系。

5.表面亲水改性： 磁珠表面经亲水基团修饰，有效减少非特异性吸附。

6.产品性能参数

生物素-核酸探针结合能力 (24nt)：≥ 450 pmol/mg 磁珠

生物素-兔 IgG 结合能力：≥ 15 μg/mg 磁珠

磁珠浓度：10 mg/mL

磁珠表面性质：亲水基团修饰

7. 产品应用

免疫检测与蛋白分离： 作为固相载体，特异性结合生物素化抗体或抗原，用于IP、Pull-down、ELISA等。

核酸分离与探针制备： 特异性结合生物素化的核酸探针，用于DNA/RNA的杂交捕获、文库制备、片段分选等。

DNA-蛋白质相互作用研究： 结合生物素化的DNA/RNA片段，用于捕获并研究与之结合的蛋白质。

细胞分选与激活： 通过固定生物素化抗体，特异性识别并分选目标细胞

使用方法（仅供参考）  

实验前准备：

   将磁珠从4℃冰箱取出，室温平衡至少30分钟，使用前用涡旋振荡器充分振荡20秒以上，使其完全重悬均匀。

   根据实验目的，提前配制好所需缓冲液。

 一、缓冲液配制（常用配方）

Buffer I (适用于结合生物素化核酸)： 10 mM Tris-HCl (pH 7.5)+1 mM EDTA+1 M NaCl+0.01%-0.1% Tween-20

Buffer II (适用于结合生物素化抗体/蛋白)：1× PBS (pH 7.4)+0.05% Tween-20(可选) 0.01%- 0.1% BSA（用于减少非特异吸附）

   化学发光洗涤液： 根据检测试剂盒要求或实验需要自行配制，使用前恢复至室温。

二、结合生物素化核酸（以100 μL磁珠悬液为例）

1.  磁珠洗涤： 取100 μL充分混匀的磁珠至离心管，置于磁力架上静置1分钟，待溶液澄清后，小心吸弃上清。加入1 mL Buffer I，涡旋或吹打重悬磁珠，再次置于磁力架分离，吸弃上清。重复洗涤一次。

2.  结合： 向洗涤后的磁珠中加入500 μL用Buffer I稀释的生物素化核酸溶液（确保终体系中磁珠浓度约为2 mg/mL），充分混匀。室温下在旋转混合仪或侧摆摇床上孵育30分钟。

3.  分离与洗涤： 孵育后，磁分离，将上清转移至新管（可备用检测结合效率）。磁珠用1 mL Buffer I洗涤3次。

4.  重悬备用： 根据后续实验步骤，用适量适宜的低盐缓冲液重悬磁珠，即可用于下游应用。

三、结合生物素化抗体/蛋白（以100 μL磁珠悬液为例）

1.  磁珠洗涤： 同上述步骤1，但使用Buffer II进行洗涤（共3次）。

2.  结合： 向洗涤后的磁珠中加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白溶液（确保终体系中磁珠浓度约为1 mg/mL），充分混匀。室温下在旋转混合仪上孵育60分钟。

3.  分离与洗涤： 磁分离，转移上清。磁珠用1 mL Buffer II洗涤5次。

4.  重悬备用： 用适量Buffer II或其他所需缓冲液重悬磁珠，用于后续实验。

四、磁微粒化学发光免疫分析（以96孔板为例）

1.  包被： 取适量磁珠，用推荐缓冲液稀释至0.2-0.8 mg/mL。向96孔板每孔加入50 μL，磁分离后弃液。

2.  捕获抗体结合： 每孔加入100 μL生物素化捕获抗体，重悬磁珠，37℃孵育15分钟。磁分离弃液，用200 μL洗涤液洗涤3次。

3.  样本孵育： 每孔加入50 μL标准品或待测样本，重悬，37℃孵育15分钟。磁分离弃液，洗涤3次。

4.  检测抗体孵育： 每孔加入100 μL酶标记检测抗体，重悬，37℃孵育15分钟。磁分离弃液，洗涤3次。

5.  显色与检测： 每孔加入150 μL化学发光底物液，避光孵育5分钟，用化学发光仪读取信号。

五、生物素-链霉亲和素复合物解离

如需回收生物素化分子或再生磁珠，可采用以下高强度变性条件：

   方法一： 加入0.1% SDS溶液，煮沸5分钟。

   方法二： 加入含95%甲酰胺的10 mM EDTA (pH 8.2) 溶液，于65℃加热5分钟或90℃加热2分钟。

   注意： 解离后磁珠的活性可能部分丧失，建议根据实验关键性评估是否重复使用。

保存条件：本产品保存在1×PBS（含0.1% BSA及0.1% proclin-300）溶液中。请置于2-8℃保存，切勿冷冻在推荐条件下可稳定保存2年。

注意事项  

1.  保存与处理： 严禁冷冻或离心磁珠，以免造成不可逆的聚集。使用前务必充分涡旋混匀。

2.  磁性分离： 每次磁性分离时间应不少于1分钟，确保磁珠完全吸附，避免损失。转移上清时，枪头勿触碰管壁磁珠聚集处。

3.  操作技巧： 使用低吸附移液器吸头和离心管，以减少磁珠挂壁损失。操作过程中尽量避免产生气泡。

4.  结合载量： 产品标注的结合能力为标准分子模型下的参考值。实际实验中，生物素化分子的大小、结构、标记效率等因素会影响实际载量，建议通过预实验确定最佳用量。

5.  饱和结合： 为达到最佳结合效率，建议加入的生物素化分子总量为磁珠理论载量的1-2倍。

6.  安全与用途：

       本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断、治疗、食品或药品。

       操作时请穿戴实验服、一次性手套，并遵守实验室安全规程。

       废弃物料请按生物危害废弃物处理规定执行。  

常见问题解答  

Q1: 磁珠在使用前需要清洗吗？

A1: 需要。使用推荐缓冲液清洗2-3次，可以去除储存液中的保护剂，使磁珠处于适合结合的状态，并减少非特异性吸附。

Q2: 结合反应的最佳孵育时间和温度是多少？

A2: 对于核酸，室温30分钟通常足够；对于抗体/蛋白，室温60分钟或4℃过夜孵育效果更佳。具体条件可根据实验优化。

Q3: 如何计算磁珠的实际使用量？

A3: 根据您的生物素化分子总量和磁珠的参考载量进行计算。例如，欲结合10 pmol的生物素化核酸，根据载量≥450 pmol/mg，所需磁珠质量至少为 10 / 450 ≈ 0.022 mg。由于磁珠浓度为10 mg/mL，则需取约2.2 μL原液。实际操作中应考虑过量添加以确保饱和。

Q4: 结合后上清中仍有未结合的目标分子，怎么办？

A4: 可能原因：1) 生物素化分子加入量不足；2) 孵育时间不够；3) 缓冲液条件不佳（如盐浓度过低）。建议增加生物素化分子用量、延长孵育时间或优化缓冲体系。

Q5: 非特异性吸附高怎么办？

A5: 可尝试：1) 在洗涤液和结合缓冲液中加入0.01-0.1% BSA或载体蛋白；2) 适当提高洗涤液中盐浓度（如NaCl至0.5-1 M）或去垢剂浓度（如Tween-20至0.1%）；3) 增加洗涤次数和体积。

Q6: 磁珠可以重复使用吗？

A6: 一般不推荐。在苛刻条件下解离后，链霉亲和素的活性会显著下降，影响下次使用的结合效率与一致性。对于关键实验，建议使用新磁珠。

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。