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  • LK-7060 紫外核酸染料(10,000× 水溶液)
  • LK-7060 紫外核酸染料(10,000× 水溶液)

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产品描述

紫外核酸染料(10,000× 水溶液)LK-7060

产品简介

紫外核酸染料是一种高效、安全、稳定的核酸染色剂,适用于多种电泳染色方法。其无毒性、高灵敏度和高稳定性使其成为EB的理想替代品。通过胶染法或泡染法,可以灵活选择适合自己实验需求的染色方法。

储存条件:4℃避光保存,可保存12个月。

产品规格:500ul5ml

产品特点

1. 无毒性:独特的油性和大分子量特性使其无法穿透细胞膜进入细胞内。艾姆斯氏试验表明,其诱变性远低于EB(溴化乙锭)。

2. 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色。对核酸迁移的影响小于SYBR Green I

3. 稳定性高:适用于微波或其他加热方法制备琼脂糖凝胶。在室温下的酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

4. 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

5. 操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解。电泳后染色只需30分钟,无需脱色或冲洗,可直接用紫外凝胶透射仪观察。

6. 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法)。适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳。可用于dsDNAssDNARNA染色。

7. EB有相同的光谱特性:无需改变滤光片及观察装置。标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用。在300nm紫外光附近可得到最佳激发。不推荐使用488nm氩离子激光器或相似波长的可见光激发。

使用方法(参考)

#1. 胶染法(推荐方法)

步骤:

1.1. 制胶时加入紫外核酸染料:

   - 例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL紫外核酸染料10,000×储液。

1.2. 按照常规方法进行电泳。

注意事项

- 染料用量相对较少。500μL染料大约可以做10050mL的胶。

- 紫外核酸染料具有良好的热稳定性,可直接加入热的琼脂糖溶液中。

- 摇晃、振荡或翻转以保证染料充分混匀。

- 也可将染料储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后加热制备琼脂糖凝胶。

- 如果条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法确认问题是否与染料有关。

- 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

#2. 泡染法

步骤:

2.1. 按照常规方法进行电泳。

2.2. 制备3×染色液:

   - H2O将紫外核酸染料10,000×储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中。

   - 例如:将15μL紫外核酸染料10,000×储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中。

2.3. 染色:

   - 将凝胶放入合适的容器中,加入足量的3×染色液浸没凝胶。

   - 室温振荡染色30分钟左右,最佳染色时间根据凝胶厚度和琼脂糖浓度略有不同。

注意事项:

- 泡染法染色时,染料用量较多。

- 单次使用的染色液可重复使用3次左右。

- 3×染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

- 在极少数情况下,质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法 以决定哪种方法更加合适。

 

名称

    

    

 

 DNA 迁移的影响

 

安全性

 

适用性

 

 

 

紫外核酸染料

 

 

 

 

 

 

 

 

 

条带不弯曲,DNA 片段不迁移

1  是一种独特的油性大分子,不易挥发 升华,不易吸入人体,不能穿透细胞 膜进入活体细胞内,安全无毒。

2  艾姆斯氏测试结果表明,紫外核酸染料  凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因 此完全

没有致癌毒性。

通用大小片段电泳染色,与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤 光片及观察装置。标准的 EB  光片或 SYBR 滤光片都适用,

使用普通紫外凝胶透射仪观察  即可,在300nm 紫外光附近可得 到最佳激发。

 

 

蓝光核酸染料

 

 

 

 

 

 

 

 

条带不弯曲,DNA

片段不迁移

1  是一种独特的油性大分子,不易挥  发升华,不易吸入人体,不能穿透细 胞膜进入活体细胞内,安全无毒。

2 艾姆斯氏测试结果表明,CelGreen   在凝胶染色浓度下完全没有诱变性, 因此完全没有致癌毒性。

 

通用大小片段电泳染色,适用于 使用254nm激发的紫外凝胶透  射仪或可见光凝胶透射仪观察。

 

SYBR

Green I

 

 

染料浓度较高时,

条带容易弯曲,

DNA 片段迁移的

现象明显

属花菁染料,能透过细胞膜进入活体细 胞内,但容易生物降解,不会在体内残 留,安全无毒。

100bp 以上电泳染色,适用于使 254nm激发的紫外凝胶透射  仪或可见光凝胶透射仪观察。

 

 

EB

 

 

 

 

 

条带不弯曲,DNA

片段不迁移

1 分子量小,易挥发升华,易吸入人  体,不易生物降解,在体内长期残留。

2 艾姆斯氏测试结果表明,EB 容易引 起有机体突变,是一种强诱变剂,具 有高致癌性。

 

100bp 以上电泳染色,背景荧光 信号高;使用普通紫外凝胶透射 仪观察。

 

 

Goldvi

ew

 

 

 

 

 

条带不弯曲,DNA 片段不迁移

1 主要成分为吖啶橙,是一种煤焦油  提取物,具有高毒,致癌,高诱变性。

2 易挥发升华,易吸入人体,能穿透  细胞膜进入活体细胞内,不易生物降 解,在体内长期残留。

100bp 以上电泳染色,背景荧光 信号高;适用于使用254nm激发 的紫外凝胶透射仪或可见光凝  胶透射仪观察。