鬼笔环肽,绿色荧光 LK-1509

产品简介

荧光标记的鬼笔环肽共轭物能够选择性地结合F-肌动蛋白。在纳摩尔浓度下使用，鬼笔环肽衍生物是用于标记、识别和定量甲醛固定和透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验中的F-肌动蛋白的便捷探针。鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体的结合紧密得多，导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数降低，从而通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。鬼笔环肽的特性使其成为通过用荧光类似物标记鬼笔环肽并用其染色肌动蛋白丝以进行光学显微镜检查来研究细胞中F-肌动蛋白分布的有用工具。荧光鬼笔环肽衍生物在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及体外观察单个肌动蛋白丝方面已被证明非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已成为高分辨率研究肌动蛋白网络的重要工具。我公司提供多种不同颜色的荧光鬼笔环肽衍生物，适用于多色成像应用。

产品规格：300Tests

实验步骤（仅供参考）

1.工作溶液制备

储备溶液：将冻干粉末溶解在300ul PBS中（适用于300次检测规格）或50ul PBS中（适用于50次检测规格）。

使用前：将1ul荧光鬼笔环肽储备溶液稀释于200ul PBS中。  

（对于荧光鬼笔环肽，建议稀释比例为1:40至1:200，每次实验相当于在200ul总染色体积中使用1-5ul储备溶液。）  

注意：可根据实验效果适当调整稀释比例。

2.固定细胞的染色

以下方案描述了在玻璃盖玻片或8孔室玻片上生长的贴壁细胞的染色程序。鬼笔环肽也可用于染色固定的冷冻或石蜡组织切片，以及酵母和真菌。

2.1. 用PBS洗涤细胞3次。

2.2. 在冰上用4%甲醛溶液（溶于PBS）固定细胞15分钟。  

   注意：甲醇在固定过程中可能会破坏肌动蛋白。因此，最好避免使用任何含甲醇的固定剂或其他溶剂型固定剂。推荐使用不含甲醇的甲醛固定剂。

2.3. 用PBS洗涤细胞3次。

2.4. 在室温下用0.5% Triton X-100（溶于PBS）透化细胞10分钟。

2.5. 用PBS洗涤细胞3次。

2.6. 将1-5ul荧光鬼笔环肽储备溶液稀释于200ul PBS中，用于每个盖玻片或腔室的染色。将染色溶液滴在盖玻片上，室温孵育20分钟。  

   注意：染色体积可根据样品调整。为避免蒸发，孵育期间将盖玻片置于有盖容器中，并盖好腔室玻片。

2.7. 用PBS洗涤2-3次。

2.8. 使用荧光显微镜成像。荧光鬼笔环肽在PBS中具有足够的光稳定性，但为了获得最佳效果，建议使用抗淬灭封片剂封片。

3.活细胞的染色

荧光标记的鬼笔环肽不具有细胞通透性，因此未广泛用于活细胞染色。然而，活细胞可通过胞饮作用或未知机制被标记。通常，活细胞染色需要更多的染色剂。此外，荧光鬼笔环肽也可通过显微注射进入细胞，用于监测肌动蛋白分布和细胞运动。

注意事项
1.荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2.本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。