Cy3-Goat-Anti Rabbit IgG (H+L),LK-7512

产品介绍  

Cy3（Cyanine 3）是一种橘红色荧光染料，激发波长（Ex）约为550 nm，发射波长（Em）约为570 nm，具有高亮度、良好的光稳定性和低背景荧光等特点，适用于免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）、流式细胞术（FACS）和Western Blot等实验。山羊来源的抗兔IgG (H+L) 二抗，经Cy3荧光标记，可特异性识别兔源一抗,适用于荧光标记实验。- Ex/Em：~550 nm / ~570 nm（橘红色荧光）推荐滤光片：TRITC/Cy3通道  

产品特点  

✔ 高灵敏度：Cy3标记提供强荧光信号，信噪比高，适用于低丰度蛋白检测。  

✔ 广泛适用性：可识别兔IgG的重链（H）和轻链（L），适用于多种实验（IF/IHC/FACS/WB）。  

✔ 高特异性：经交叉吸附处理，降低与非靶标物种（如小鼠、大鼠、人）的交叉反应。  

✔ 稳定可靠：严格质控，确保批次间一致性。   

使用方法  

免疫荧光（IF）/免疫组化（IHC）  

1. 样本准备：固定细胞或组织切片，进行透化（如0.1% Triton X-100处理）和封闭（5% BSA或血清，室温30 min）。  

2. 一抗孵育：滴加兔源一抗（如1:50-1:1000稀释），4℃过夜或室温1-2 h。  

3. 洗涤：用PBS或TBST洗涤3次，每次5 min。  

4. 二抗孵育：滴加Cy3标记山羊抗兔IgG（推荐1:100-1:1000稀释），避光室温孵育1 h。  

5. 洗涤：PBS洗3次，去除未结合二抗。  

6. 封片观察：抗淬灭封片剂封片，荧光显微镜（Cy3通道）观察。  

流式细胞术（FACS）  

1. 细胞处理：固定（如4% PFA）和透化（如0.1% Triton X-100）。  

2. 一抗孵育：兔源一抗（1:50-1:500）4℃孵育30 min。  

3. 洗涤：PBS洗2次。  

4. 二抗孵育：Cy3标记山羊抗兔IgG（1:100-1:1000），避光孵育30 min。  

5. 洗涤后上机检测：流式细胞仪（Ex 488 nm或561 nm，Em 570 nm附近检测）。  

Western Blot（WB）  

1. 转膜后封闭：5%脱脂牛奶或BSA封闭1 h。  

2. 一抗孵育：兔源一抗（1:1000-1:5000）4℃过夜。  

3. 洗涤：TBST洗3次，每次10 min。  

4. 二抗孵育：Cy3标记山羊抗兔IgG（1:5000-1:10000），室温避光1 h。  

5. 成像：荧光扫描仪（Cy3通道）检测。  

储存条件  

- 储存温度：-20℃避光保存，避免反复冻融。 有效期：12个月。  

注意事项  

1.避光操作：Cy3对光敏感，建议全程避光（铝箔包裹或暗处操作）。  

2.优化稀释比例：不同实验体系需优化二抗稀释度（参考范围1:200-1:10000）。  

3.避免反复冻融：分装保存，-20℃避光长期储存，避免反复冻融。  

4.对照实验：设置阴性对照（不加一抗，仅二抗）排除非特异性结合。设置同型对照（非免疫兔IgG + 二抗）验证信号特异性。  

5.多色实验：若与其他荧光染料（如FITC、DAPI）联用，需调整滤光片避免串色。  

6.本产品仅供科研使用，不可用于诊断或治疗。