人淋巴细胞分离液，LK-69020

产品描述

人淋巴细胞分离液为即用型，含有聚蔗糖，它能加速红细胞皱缩沉淀，有助于提高淋巴细胞的分离效果。该产品为无菌包装，通过内毒素检测。分离获得的细胞经洗涤后能用于体外培养，不影响后续实验操作。

本品采用密度梯度沉降法，根据细胞密度差异，借助分离液和离心，进行细胞分离纯化。细胞梯度密度分离液产生一定程度的密度梯度，将抗凝全血倒入分离管。离心后红细胞、粒细胞沉于管底；PBMC（单个核细胞，包括淋巴细胞和单核细胞等）漂浮于分离液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分离液液面的细胞，就可从外周血中分离到淋巴细胞。

产品参数

内毒素含量:< 0.5 EU/mL ;分离液密度: 1.077±0.001) g/mL (20℃) ;渗透压:290±15 mOsmol/kg

效期:未开封 2-30℃避光保存，有效期为 2 年。开封后2-8℃,3个月有效。

使用方法（仅供参考）

1. 取新鲜抗凝全血（EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝剂均可）。用等体积等渗溶液（PBS 或

生理盐水）稀释全血。

2. 使用前需恢复至室温，在离心管中加入一定体积的分离液，将稀释后的血样平铺到分离液液面上方，保持两液面界面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、等渗溶液（PBS 或生理盐水）体积为 1:1:1。

3. 室温，水平转子 700 g~800 g 离心 20~30 min。设置较慢的升降速（如果共有十档且第十档为最高档，升降速应该调整到第三档）。

4. 离心结束后，管底是红细胞，中间层是分离液，最上层是血浆匀浆层，血浆层与分离液层之间是一层薄且致密的白膜，即：单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞）层。小心吸取白膜层到另一离心管中。

5. 用等渗溶液（PBS、生理盐水或培养基）稀释到一定体积，颠倒混匀。室温，水平转子 250 g，离心 10 min 弃上清。重复洗涤 1~2 次。

6. 用等渗溶液（PBS、生理盐水或培养基）将细胞重悬备用。

样本要求：新鲜的抗凝血，收集时应无菌处理保存，避免冷冻和冷藏。

注意事项

1. 本产品为无菌产品，请在无菌条件下，混匀后开启。

2. 稀释抗凝全血所用的PBS、生理盐水等溶液，均为无菌液体，且不含钙镁离子。

3. 1:1 稀释血液可降低红细胞的凝聚，提高淋巴细胞收获量。

4. 为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋巴细胞和单核细胞。

5. 健康人新鲜外周血，推荐分离条件是 800 g，20 min；如果外周血采集后放置时间过长，可能会造成分离效果变差红细胞残留增多，可以适当延长离心时间改善分离效果。

6. 若操作无误但离心后的界面之间不能形成单个核细胞层，可能是血液量不足，或未使用新鲜血液，或者不适于分离该样本类型血液。

7. 分离液使用后，请2-8℃保存，避免液体挥发造成分离液密度变化，影响分离效果。

8. 离心机性能差异，可能影响分离效果，实验中可以摸索离心转数和离心的时间，以达到最佳的分离条件。

产品声明

1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.我公司所有产品仅限科学研究实验使用，严禁其他用途，因用于其他用途引起的人身财产安全事故，本公司概不负责。

3.由于科研实验本身存在不确定性和失败风险，对于珍贵样本务必谨慎使用，或者使用前请用普通样本做预实验，确保实验条件和方案成熟，以免对珍贵样本造成不可挽回的浪费和其他实验损失。产品如遇质量问题，售后仅限产品本身，不涉及连带其他任何赔偿。

4.介于科研实验的样本类型复杂性，实验因素多样性，本产品提供的产品说明书仅供参考，如所需实验与本说明书提供的实验信息不一致，请自行查阅文献。