超敏ECL发光液(fg级），LK-6367

产品介绍  

本产品是一种基于鲁米诺（Luminol）和增强剂的高效、超敏化学发光底物液，专门用于Western Blot实验中辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体或蛋白的检测。其灵敏度极高，可稳定检测低至飞克（fg）级别的目标蛋白，远超常规ECL试剂。优化的配方提供了超强的信号强度和极低的背景噪音，适用于低丰度蛋白的检测，并能有效减少抗体消耗。  

产品特点  

1.  超高灵敏度： 核心优势。可清晰检测低至飞克（fg）级别的目标蛋白，是检测稀有蛋白和弱表达蛋白的理想选择。

2.  信噪比优异： 优化的增强剂体系有效放大化学发光信号，同时将非特异性背景降至极低，确保结果清晰可靠。

3.  信号稳定持久： 发光信号强度高，持续时间长（通常可达数小时），为用户提供充足的曝光和多次重复曝光时间。

4.  兼容性强： 适用于各种PVDF膜和NC膜。

5.  使用便捷： 即用型工作液，现用现配，操作简单。  

使用方法（仅供参考）  

1. 实验准备：

   完成Western Blot的一抗、二抗（HRP标记）孵育及洗膜步骤。

   准备好显影成像系统（化学发光成像仪或X光片夹）。

2. 工作液配制：

   根据待测膜的面积，按等体积比例（推荐1：1）吸取A液和B液于洁净的避光离心管中。

   例如： 取1 mL A液与1 mL B液混合，轻轻涡旋或用移液器吹打混匀（避免剧烈摇晃产生过多气泡）。

   注意： 工作液需现用现配，并在配制后30分钟内使用，以保证最佳效果。

3. 显影操作：

   用镊子将膜从洗膜液中取出，用滤纸轻轻吸去边缘多余液体（切勿使膜完全干燥）。

   将混合好的工作液均匀滴加在膜的蛋白面，确保完全覆盖，室温孵育1-5分钟。

   用镊子夹住膜，沥去多余工作液，将膜置于两片洁净的透明保护袋或保鲜膜中，赶走气泡。

   将膜蛋白面朝上，放入成像仪中进行曝光检测。

   建议： 初次检测时，尝试不同的曝光时间（如1s， 10s， 60s），以获取最佳图像。

4. 成像与记录：

   在化学发光成像系统中选择合适的曝光时间采集图像。

   如需压X光片，请在暗室中将膜与X光片紧密接触，根据信号强弱确定曝光时间。  

注意事项  

1.  避光操作： 本品对光敏感。B液尤其需严格避光保存，配制和工作液操作时也应在尽量避免强光照射下进行。

2.  现用现配： 混合后的工作液会随时间衰减，请务必在30分钟内使用。

3.  防止污染： 取用A液和B液时，请使用干净的吸头，防止交叉污染导致失效。切勿将吸取A液的吸头直接放入B液中。

4.  个人防护： 操作时请穿戴实验服和手套，避免试剂直接接触皮肤或眼睛。如不慎接触，请立即用大量清水冲洗。

5.  膜的状态： 显影前，膜必须保持湿润，但也不能有过多的TBS或PBST残留，否则会稀释工作液，影响效果。

6.  储存条件： 请于4℃避光保存，切勿冷冻。冷冻会导致试剂析出、失效。有效期通常为12个月。

7.  抗体优化： 使用如此高灵敏度的底物时，建议适当降低一抗和二抗的浓度，以避免信号过强和背景过高。  

常见问题解答  

Q1： 为什么我的信号很弱甚至没有信号？

   原因可能： ① 一抗或二抗（HRP）失效或用量不足；② HRP酶失活（避免使用含叠氮钠的缓冲液）；③ 工作液配制后放置过久失效；④ 曝光时间过短；⑤ 膜上的蛋白量确实低于检测下限。

Q2： 为什么背景很高？

   原因可能： ① 一抗或二抗浓度过高；② 膜封闭不充分或洗膜不彻底；③ 工作液孵育时间过长；④ 膜在显影前过于干燥。

Q3： 信号持续时间很短，来不及拍照怎么办？

   这通常与底物体系本身无关，更多可能是HRP酶活性过快消耗底物所致。请检查二抗HRP活性是否过高。本产品信号通常可持续数小时，请确保在配制后尽快使用。

Q4： A液或B液出现结晶或沉淀怎么办？

   请将试剂从4℃冰箱取出，室温避光放置使其自然回温并轻轻摇晃/涡旋，直至沉淀完全溶解后再使用。此为正常现象，不影响性能。

Q5： 可以用于荧光标记抗体的检测吗？

   不可以。 本产品是专用于辣根过氧化物酶（HRP） 的化学发光底物，不能用于其他标记系统（如碱性磷酸酶AP、荧光基团）。

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。