Agarose琼脂糖 ，LK-2301

产品介绍  

琼脂糖是一种从海藻中提取的线性多糖聚合物，是琼脂经过纯化后去除含硫酸根和羧基的多糖后的中性组分。它是分子生物学、生物化学和遗传学研究中用于进行琼脂糖凝胶电泳的核心材料。

本品为白色或微黄色粉末，在热水中溶解，冷却后形成均匀的、具有一定孔径大小的三维网状结构凝胶。其孔径大小取决于琼脂糖的浓度。该网状结构可作为分子筛，在电场作用下，不同大小的DNA/RNA分子得以分离和分析。本产品具有低电内渗（EEO）、高凝胶强度和透明度好等特点，适用于常规核酸片段的分离、鉴定和纯化。

产品特点  

1.  高纯度： 经过精制纯化，杂质含量低，对酶切、连接、PCR等下游实验无抑制。

2.  低电内渗（EEO）： EEO值 ≤ 0.15，减少了电泳过程中的电渗现象，确保DNA/RNA片段迁移的准确性和分辨率。

3.  高凝胶强度： 凝胶强度高，操作方便，不易破损，便于后续染色、脱色及成像处理。

4.  良好的透明度： 形成的凝胶透明度高，背景清晰，有利于核酸条带的观察和成像。

5.  溶解迅速： 在缓冲液中加热溶解快速，易于配制。

6.  广泛的适用性： 适用于水平式琼脂糖凝胶电泳，可与各种核酸染料（如GelRed, EB, SYBR Safe等）兼容。

使用方法（仅供参考）  

注意： 具体比例和条件请根据您的实验需求（如待分离核酸片段的大小）进行优化。

1. 凝胶浓度选择参考表

2. 操作步骤

1.  称量： 根据所需凝胶浓度，准确称取适量琼脂糖粉末，置于锥形瓶（如三角烧瓶）中。

2.  配制缓冲液： 量取适量电泳缓冲液（通常为1x TAE或0.5x TBE）加入锥形瓶。注意： 缓冲液体积不应超过锥形瓶容量的三分之一，以防沸腾时溢出。

3.  加热溶解： 使用微波炉或水浴锅加热，间歇摇晃，直至琼脂糖完全溶解，溶液变得清澈透明，无任何颗粒状物质。注意： 微波加热时，溶液可能过热暴沸，请小心操作，佩戴防热手套。

4.  冷却： 将溶解的琼脂糖溶液冷却至约50-60℃（手感觉温热但不烫手即可）。

5.  添加核酸染料（如需要）： 若使用对光不敏感的染料（如GelRed），可在此时加入并混匀。若使用EB（溴化乙锭），强烈建议在凝胶凝固后于电泳槽中进行染色，并注意安全防护。

6.  倒胶： 将琼脂糖溶液倒入已封好的凝胶模具中，并立即插上合适的梳子。

7.  凝固： 在室温下静置约20-30分钟，直至凝胶完全凝固，呈乳白色不透明状。

8.  上样与电泳： 将凝固的凝胶放入电泳槽中，加入恰好没过凝胶表面的电泳缓冲液。垂直向上小心拔出梳子。将DNA样品与上样缓冲液混合后，用微量移液器点入加样孔中。接通电源，根据实验要求设定合适电压进行电泳（通常为5-10 V/cm凝胶长度）。

9.  成像： 当指示剂（溴酚蓝或二甲苯青）迁移至适当位置时，停止电泳。在紫外凝胶成像系统或蓝光透射仪下观察并拍照记录。

注意事项  

1.  安全操作：

       加热琼脂糖溶液时，谨防烫伤。使用微波炉加热应短时多次，中间摇匀。

       若使用EB等诱变剂，必须佩戴专用手套，并按照实验室有害废弃物处理规定进行处理，严禁随意丢弃。

       紫外灯下观察凝胶时，务必佩戴防紫外线面罩或眼镜，避免皮肤和眼睛直接暴露于紫外线下。

2.  实验材料：

       请使用新鲜配制的电泳缓冲液，重复使用可能导致离子强度变化，影响电泳效果。

       确保制胶模具和梳子干燥清洁。

3.  常见问题预防：

       凝胶不凝固： 可能因琼脂糖浓度过低、缓冲液pH不当或未完全溶解所致。

       点样孔破损： 拔梳子时用力过猛或角度不当；凝胶未完全凝固。

       DNA条带模糊/弥散： 凝胶不均匀；电压过高导致产热过多；DNA样品降解或含有高浓度盐分。

常见问题解答  

Q1: 我应该选择TAE还是TBE缓冲液？

A1: TAE对于大片段DNA (>12 kb) 的分离效果更好，且更适用于后续的DNA回收实验。TBE缓冲能力更强，对于小片段DNA (<1 kb) 的分辨率更高，并能有效防止DNA变性。常规分析电泳两者均可，可根据实验习惯选择。

Q2: 为什么我的DNA条带跑歪了或者拖尾？

A2:

   跑歪： 可能因为凝胶未放平、电极不平衡或点样时戳破了加样孔底部。

   拖尾： 可能原因有：DNA样品量过多、部分降解、含有蛋白质或盐分过高、琼脂糖凝胶质量不佳或有杂质。

Q3: 为什么我的凝胶背景噪音很高（成像时整个胶都很亮）？

A3: 最常见的原因是核酸染料用量过多或染色时间过长。请按照推荐比例使用染料。此外，如果DNA样品发生严重降解，也会导致背景弥散。

Q4: 如何提高小片段DNA（比如<100 bp）的分辨率？

A4: 可以尝试使用更高浓度的琼脂糖凝胶（如2.5%-3%），或者选用专门的高分辨率琼脂糖。同时，降低电泳电压并延长电泳时间也有助于提高分辨率。

Q5: 配制好的琼脂糖凝胶可以保存多久？

A5: 将凝固的凝胶浸泡在电泳缓冲液中，于4℃密封保存，通常可存放2-3天。但建议最好新鲜配制使用，以防水分蒸发或微生物生长影响结果。  

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。