DNA Ladder （100-600bp） ，LK-2560

产品介绍  

本产品是由一系列酶切精确的DNA片段混合而成，专为中等范围核酸片段的高精度分子量定量和大小分析而设计。条带范围覆盖100bp至600bp，包含100bp, 200bp, 300bp, 400bp, 500bp, 600bp等主要条带，其中500bp条带为超高亮度参考带，便于快速定位和方向判断。

本品已预混有上样染料，可直接用于琼脂糖凝胶电泳，简化操作流程。适用于PCR产物鉴定、酶切产物分析、克隆片段大小确定等分子生物学实验。

产品特点  

1.  条带清晰，分布均匀： 条带覆盖100-600bp关键区间，间隔为100bp，便于对未知DNA片段进行精确的分子量估算。

2.  高亮度参考带： 500bp条带为超高亮度条带，浓度是其他条带的5倍以上，可作为清晰的参照点，轻松判断凝胶方向并辅助估算其他条带大小。

3.  即用型预混液： 已含有惰性染料（如溴酚蓝和/或二甲苯青），无需添加上样缓冲液，可直接点样，操作简便。

4.  浓度精准： 每条带浓度均经过精确校准，在常规琼脂糖凝胶电泳中能呈现清晰、锐利的条带，便于结果分析。

5.  质量稳定： 适用于常规分析和定量估算，批间差小，结果稳定可靠。 

使用方法（仅供参考）  

注意： 请在进行电泳前将本品完全解冻并混匀，以确保条带强度的均一性。

1.  预处理： 从-20℃冰箱中取出本品，室温下或置于手掌中轻轻晃动使其完全融化。使用前短暂离心，将管壁液体收集至管底。

2.  上样： 取 5μL 本品直接加入到琼脂糖凝胶的加样孔中。

       建议： 在第一次使用本产品或更换凝胶浓度时，可在相邻的加样孔中点上您熟悉的另一款Ladder作为对比。

3.  电泳： 在1x TAE或0.5x TBE缓冲液中，以5-8 V/cm的电压进行恒压电泳。

4.  观察： 当溴酚蓝（通常迁移至约300-400bp位置）迁移至凝胶长度的2/3至3/4时，停止电泳。

5.  染色与成像： 将凝胶置于合适的核酸染料（如GelRed、EB等）中染色，然后在紫外凝胶成像系统或蓝光透射仪下观察并拍照。

推荐琼脂糖凝胶浓度： 1.2% - 1.5% 可获得最佳分离效果。

注意事项  

1.  储存与冻融：

       请于-20℃保存。长期置于4℃或室温可能导致产品降解。

       避免反复冻融，否则会影响条带清晰度和定量准确性。建议根据日常使用量进行分装保存。

2.  操作安全：

       电泳及紫外观察过程中，请遵循实验室安全规程。若使用EB，需佩戴手套并按规定处理废胶和缓冲液。

       紫外线对眼睛和皮肤有伤害，观察凝胶时务必佩戴防紫外线面罩或眼镜。

3.  上样技巧：

       上样前务必充分混匀但避免剧烈涡旋，以防打断DNA片段。

       确保加样孔完好，点样时枪头不要戳破凝胶孔底部。

4.  结果判读：

       分子量标准曲线在低浓度凝胶或长时间电泳下可能非完全线性，建议在相同条件下对未知样品和Ladder进行比较。

       若条带出现拖尾或扩散，请检查凝胶配制是否均匀、电泳电压是否过高或缓冲液是否重复使用过多。

常见问题解答  

Q1: 为什么我的Ladder条带模糊或拖尾？

A1: 可能原因有：

   凝胶问题： 琼脂糖凝胶未完全凝固或配制不均匀。

   电泳条件不当： 电压过高导致产热过多，使DNA条带扩散。请尝试降低电压。

   缓冲液问题： 电泳缓冲液重复使用次数过多，离子强度下降，pH改变。

   样品降解： Ladder被核酸酶污染或反复冻融导致降解（请检查分装储存条件）。

Q2: 为什么500bp的条带特别亮？这是否正常？

A2: 完全正常。这正是本产品的设计特点。500bp条带被特意加浓，作为超高亮度参考带，旨在帮助您在成像时快速定位和判断凝胶的正反及方向。

Q3: 我可以使用这个Ladder进行DNA浓度定量吗？

A3: 本产品主要适用于分子量大小的标定，可用于粗略的浓度估算。但如果您需要进行精确定量（如通过软件分析荧光强度），建议使用专门为定量设计的Ladder，其条带浓度经过了更严格的校准。

Q4: 上样量多少合适？

A4: 推荐上样量为5μL。如果条带太弱，可适当增加至8μL；如果条带过亮甚至溢出，可减少至3μL。请根据您的凝胶厚度和成像系统灵敏度进行优化。

Q5: 这个Ladder能用于聚丙烯酰胺凝胶电泳吗？

A5: 本品是为琼脂糖凝胶电泳优化的。虽然可以用于非变性聚丙烯酰胺凝胶，但迁移率可能会有所不同，且条带分辨率可能不是最优。建议为聚丙烯酰胺凝胶电泳选择专用的Ladder。

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。