细胞包被工作液，LK-1610

产品介绍  

细胞包被工作液是使用Matrigel配制好的即用型工作液，可以神经元、上皮，角质形成等细胞提供理想的底物支持。本细胞包被工作液是一种即用型、无菌的溶液，主要成分为从天然组织中提取的胶原蛋白，并含有其他有助于细胞贴附的因子。它能在培养器皿（如培养瓶、培养皿、多孔板等）表面模拟细胞外基质环境，形成一层薄膜，从而有效促进贴壁细胞（尤其是原代细胞、敏感细胞系和干细胞）的粘附、铺展、生长和增殖，并有助于维持细胞的功能和分化潜能。

产品特点  

1.  即用型配方：无需自行配制和稀释，开瓶即用，省时省力，保证了结果的一致性。

2.  广泛适用性：适用于多种难贴壁细胞，如原代内皮细胞、神经元细胞、肝细胞、间充质干细胞等。

3.  促进细胞活力：通过提供生物相容性良好的基质，显著提高细胞贴壁率和存活率，促进细胞保持良好形态和功能。

4.  无菌保证：溶液经过0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养，避免微生物污染风险。

5.  操作简便：包被过程简单快捷，孵育后即可使用，或可干燥后长期保存。  

使用方法（仅供参考）  

实验前准备：

   将包被工作液从冰箱取出，恢复至室温（15-25°C）后再开盖，以防冷凝水污染。

   准备好需要包被的细胞培养器皿（如培养瓶、皿、孔板等）。

标准包被步骤：

1.  稀释（可选）：

       对于大多数细胞类型，本工作液可直接使用。对于特别敏感的细胞或需要降低包被强度时，可用无菌PBS或无菌纯水按建议比例（如1:10至1:100）进行稀释。具体稀释比例请参考相关细胞培养的文献或预实验条件。

2.  包被：

       向培养器皿中加入足量的包被工作液，确保液层能完全覆盖培养表面。

       参考用量：

           96孔板：每孔 50 - 100 μL

           24孔板：每孔 200 - 500 μL

           6孔板：每孔 1 - 2 mL

           培养瓶（T25）：2 - 3 mL

       轻轻摇晃器皿，确保溶液均匀覆盖整个底面。

3.  孵育：

       将包被好的器皿置于培养箱（37°C）或室温（20-25°C）下孵育。

       孵育时间：至少1小时，为达到最佳效果，建议孵育过夜（12-16小时）。孵育时间越长，包被效果通常越稳定。

4.  准备使用：

       方法一（常用）：孵育结束后，在超净工作台内用无菌吸头彻底吸弃包被液。

       方法二（干燥法，适用于长期保存）：在超净台内吸弃大部分液体，打开皿盖，让残留液体在无菌条件下自然风干（通常需要数小时）。

       注意：吸弃后或干燥后的器皿表面会留下一层不可见的蛋白薄膜。请不要用PBS或培养基冲洗，以免洗掉包被层。

5.  接种细胞：

       将准备好的包被器皿直接用于细胞接种。加入细胞悬液后，可轻柔晃动器皿使细胞分布均匀。

       随后即可按标准流程将器皿放入37°C， 5% CO₂培养箱中开始培养。  

注意事项  

1.无菌操作：整个包被过程应在超净工作台内进行，避免微生物污染。

2.避免污染：取用包被工作液时，请使用无菌吸头，避免直接倾倒，以防溶液被污染。

3.温度敏感性：虽然建议恢复至室温使用，但请勿将本品长时间置于高温环境（如37°C水浴）中，以免蛋白变性失活。

4.预先分装：为保证产品稳定性，不建议将整瓶试剂反复拿入/拿出超净台。可根据每次用量预先进行无菌分装。

5.个人防护：本品虽经无菌处理，但仍需作为生物制品对待，操作时请佩戴实验服和手套。  

常见问题解答  

Q1: 包被后的器皿需要冲洗吗？

   A1: 通常情况下不需要冲洗。吸弃包被液后，器皿表面附着的微量蛋白正是起作用的包被层。冲洗会显著降低甚至完全去除这层膜，影响包被效果。仅在特定实验要求下，才考虑用无菌PBS快速润洗一次。

Q2: 包被好的器皿可以储存多久？

   A2: 吸弃包被液后，可立即使用或密封后于2-8°C保存，建议在1周内使用。若采用干燥法处理，器皿可密封后于室温或2-8°C长期保存（如1个月），但使用前建议用紫外线照射30分钟以确保无菌。

Q3: 如何确定最适合我细胞的包被浓度？

   A3: 建议进行浓度梯度测试。将包被工作液用PBS稀释成不同浓度（如1:10, 1:50, 1:100），分别包被孔板，然后接种细胞。通过比较细胞的贴壁率、铺展形态和生长速度，来确定最佳包被浓度。

Q4: 我的细胞贴壁效果依然不理想，可能是什么原因？

   A4: 可能原因包括：① 包被时间不足；② 包被浓度过低，可尝试提高浓度或使用原液；③ 细胞本身状态不佳或传代次数过多；④ 细胞消化过度，损伤了细胞膜表面的整合素；⑤ 接种细胞时密度过低。

Q5: 本品可以用于包被玻璃底培养皿或盖玻片吗？

   A5: 可以。本品适用于各种常用于细胞培养的材质表面，包括聚苯乙烯塑料、玻璃等。包被方法同上  

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。