蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 100X)，LK-2910

产品介绍  

本产品是专为细菌蛋白提取优化的广谱蛋白酶抑制剂混合物，浓度为 100 倍（100X）。  

含有多种高效蛋白酶抑制剂，可有效抑制细菌内源性和外源性丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶及金属蛋白酶，防止目标蛋白在提取过程中被降解。

适用于大肠杆菌及其他革兰氏阴性/阳性菌的裂解液、超声破碎液、冻融裂解液等蛋白提取体系。

产品特点  

- 广谱抑制：覆盖丝氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸及金属蛋白酶

- 即用型：100X 浓缩液，使用方便

- 兼容性好：与常用裂解液（如 RIPA、PBS、Tris-HCl、BugBuster 等）兼容

- 不含 EDTA（可选）：便于后续 IMAC 纯化（如需含 EDTA 版本，请选用 PIC-BE100）

- 稳定性高：-20℃ 可保存 12 个月

使用方法（仅供参考）  

1. 工作浓度

- 推荐终浓度：1X  

- 即：每 1 mL 裂解液中加入 10 μL 本产品（100X）。

2. 操作步骤（以细菌裂解为例）

1. 收集细菌沉淀，弃上清。

2. 按细菌湿重加入适量裂解液（例如：每 50 mg 菌体加入 1 mL 裂解液）。

3. 临用前向裂解液中加入蛋白酶抑制剂混合物（100X），使终浓度为 1X。  

   - 例：5 mL 裂解液 + 50 μL 抑制剂混合物。

4. 加入溶菌酶（可选）或直接进行超声/高压破碎。

5. 全程 冰上或 4℃ 操作。

6. 裂解后 4℃，12,000–16,000×g 离心 20 分钟，取上清即为蛋白提取液。

> 注意：抑制剂加入裂解液后应在 1 小时内使用，不可长期存放。  

注意事项  

1. 本产品仅用于科研实验，不可用于临床诊断或人体。

2. 部分抑制剂对人体有刺激性，操作时请戴手套、穿实验服。

3. 避免反复冻融，建议初次解冻后分装保存（如 50 μL/管）。

4. 若蛋白用于 2D 电泳，建议先测试是否影响等电聚焦。

5. 如需抑制金属蛋白酶，请选择含 EDTA 版本（如产品 PIC-BE100），但 EDTA 可能影响金属亲和层析。

常见问题解答  

Q1：为什么提取的蛋白仍然出现降解条带？  

A：可能原因及解决建议：  

- 抑制剂加入时间过晚 → 应在裂解液接触细胞前加入。  

- 裂解过程温度过高 → 全程冰上操作。  

- 某些蛋白酶过量表达 → 可尝试增加抑制剂终浓度至 2X。  

- 样品本身存在热稳定蛋白酶 → 增加 PMSF（终浓度 1 mM）。

Q2：可以用于哺乳动物细胞吗？  

A：本配方针对细菌蛋白酶优化，哺乳动物细胞建议使用专用哺乳动物型抑制剂混合物。

Q3：加入抑制剂后裂解液可以保存多久？  

A：建议 1 小时内完成裂解。若需短暂保存，可放在冰上（不超过 4 小时），不可冻存。

Q4：是否影响 BCA 定量？  

A：不影响常规 BCA 或 Bradford 法测定蛋白浓度。

Q5：是否与巯基还原剂（如 DTT、β-ME）兼容？  

A：兼容，不会影响抑制剂活性。

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。