0.2μm PVDF 转印膜（Western Blot 专用），LK-6389

产品编号： LK-6389

规格： 26cmx1m / 2m / 4m / 卷

孔径： 0.2 μm

产品背景介绍

本产品为聚偏二氟乙烯（Polyvinylidene Fluoride, PVDF）印迹膜，采用进口原料制成。PVDF 膜是生命科学研究中最常用的固相支持介质之一，主要用于免疫印迹（Western Blot）实验中蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶向膜载体的转移。

与传统的硝酸纤维素膜（NC 膜）相比，PVDF 膜具有极高的机械强度，不易卷曲或碎裂，且蛋白结合容量高。因其强疏水性，膜对蛋白质具有极高的亲和力，尤其适合低分子量蛋白的检测及 N 端测序分析。

产品特点

1. 高截留率： 0.2μm 孔径，能有效截留分子量 < 20 kDa 的小分子蛋白，防止转膜过度穿透。

2. 高强度： 机械强度优异，耐受反复清洗、剥离抗体（Stripping）及多次杂交操作。

3. 兼容性强：

   · 染色兼容： 支持丽春红（可逆）、考马斯亮蓝（不可逆）、胶体金等多种染色方式。

   · 检测兼容： 适用于化学发光（ECL）、常规显色（DAB/TMB）及同位素检测。

4. 低背景： 进口原料保障，非特异性吸附极低，信噪比高。

产品使用方法（仅供参考）

重要提示： PVDF 膜具有强疏水性，使用前必须进行活化预处理。

1. 膜的活化（预处理）：

   · 裁剪所需大小的膜，置于 100% 甲醇（或 95% 乙醇） 中浸泡 15-30 秒，直至膜变为半透明状。

   · 倒掉甲醇，加入预冷的 转膜缓冲液（Transfer Buffer） 平衡 5-10 分钟，待用。

2. 转膜（湿转法参考）：

   · 按照“阴极（黑）-海绵-滤纸-凝胶-PVDF膜-滤纸-海绵-阳极（红）”顺序制备转印夹层，确保无气泡。

   · 根据蛋白分子量调整转膜电流和时间（如 200-300mA 恒流，时间依分子量而定）。

3. 封闭与免疫检测：

   · 转膜结束后，立即将膜浸入 5% 脱脂牛奶/TBST 中，室温慢摇封闭 1 小时。

   · 加入一抗孵育、洗涤、加入二抗孵育、洗涤。

   · 滴加 ECL 发光液进行暗室曝光或成像仪检测。

产品使用注意事项

1. 活化操作： 请勿让活化后的膜干燥，否则需重新用甲醇活化。

2. 取用卫生： 请务必佩戴手套，使用平头镊子夹取膜的边缘或标记处，切勿用手直接触摸膜表面，以免留下背景污渍。

3. 小分子蛋白： 若检测 < 20 kDa 蛋白，请务必选用 0.2μm 孔径膜（本产品），若使用 0.45μm 孔径易发生转膜穿透导致信号丢失。

4. 荧光检测： 若使用 LI-COR Odyssey 等荧光成像系统，常规 PVDF 膜可能有自体荧光背景，建议更换为专用的低荧光 PVDF 膜。

常见问题解答（FAQ）

Q1：为什么转膜后丽春红染色显示 Marker 条带模糊或缺失？

A1：请检查：

1. 转膜前 PVDF 膜是否经甲醇充分活化（未活化的膜不结合蛋白）。

2. 转膜夹层中是否存在气泡。

3. 转膜时间是否过长导致小蛋白穿透膜进入滤纸（本膜为 0.2μm 孔径，转膜时间通常略短于 0.45μm 膜）。

Q2：膜上出现黑点或高背景脏污？

A2：这通常是手印或颗粒污染导致。请确认操作时使用干净平头镊子，且封闭液（牛奶）完全溶解无颗粒。

Q3：该膜能否反复剥离抗体（Stripping）使用？

A3：可以。PVDF 膜的机械强度支持温和或剧烈的 Stripping Buffer 洗脱，相比 NC 膜更耐用，不易破损。

产品声明

1. 用途限制： 本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断、治疗、食品、药品或存放于普通住宅内。

2. 实验风险告知： 由于科研实验本身具有探索性、未知性和多变量特性，若实验涉及珍贵样本，请务必自行开展小规模预实验，确认本产品效果满足实验要求后，再应用于大批量关键实验。

3. 售后范围： 本产品售后服务仅限产品本身质量问题，对于因使用本产品造成的任何间接损失、样本损耗或数据偏差，本公司不承担任何连带责任。购买即视为同意此条款。

4. 安全操作： 为了您的安全与健康，操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。