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BAFF, Soluble (human) (60-mer) (rec.) (highly active),RPH110673
产品介绍
本品是一种由哺乳动物细胞(如HEK293细胞)重组表达的高纯度、可溶性人B细胞活化因子。BAFF也被称为BLyS、TNFSF13B,是肿瘤坏死因子超家族的一员,是B细胞存活、增殖和成熟的关键细胞因子。
本产品经过基因工程优化,形成了稳定的同源三聚体结构,并进一步组装成具有极高生物活性的60聚体(类似病毒颗粒的簇状结构)。这种60聚体形式能高效地交联并激活细胞膜上的BAFF受体(BAFF-R、BCMA和TACI),从而在体外实验中展现出远超常规三聚体BAFF的生物学活性。
产品特点
1. 超高生物活性: 独特的60聚体结构,使其与受体的结合能力和激活信号的能力远超普通三聚体BAFF,在诱导B细胞增殖和存活实验中,EC50通常可达低纳摩尔甚至皮摩尔级别。
2. 高纯度与高稳定性: 采用先进的纯化工艺(如亲和层析、分子筛层析),SDS-PAGE检测纯度 >98%。60聚体结构在溶液中非常稳定,确保了实验结果的可靠性和可重复性。
3. 正确的天然结构: 哺乳动物细胞表达系统保证了蛋白质的正确折叠、组装和糖基化,其结构和功能与天然人BAFF高度一致。
4. 无动物源成分: 生产过程中无动物源成分,极大降低了外源病原体污染的风险,适用于细胞治疗、疫苗研发等严格要求领域。
5. 卓越的批间一致性: 严格的生产质控体系,确保不同批次间蛋白的活性和纯度高度一致
使用方法(仅供参考)
1. 储存与解冻:
储存: 收到产品后,请立即于-20°C或-80°C条件下冻存。
解冻: 使用前,请将蛋白置于冰上缓慢解冻。为保持最佳活性,建议将原液分装后冻存,避免反复冻融。
稀释: 建议使用含载体蛋白(如0.1% BSA或1% FBS)的PBS或细胞培养基进行稀释,以防止蛋白在低浓度下吸附在管壁而损失。
2. 推荐实验用量:
注意: 以下浓度为起始参考剂量,具体的最佳工作浓度需根据您的细胞类型、实验体系和培养条件通过剂量反应曲线进行优化。
B细胞增殖实验: 推荐起始浓度 1 - 10 ng/mL。
B细胞存活实验: 推荐起始浓度 0.5 - 5 ng/mL。
受体结合实验(ELISA/SPR): 请根据具体实验设计进行滴定,推荐起始浓度 0.1 - 10 nM。
信号通路研究: 推荐起始浓度 5 - 50 ng/mL。
3. 活性检测参考(质量控制数据):
通过测量其对人或小鼠B细胞(如纯化的B细胞或脾细胞)增殖/存活的支持能力来测定。
示例: 在存在抗人IgM抗体的情况下,本品对人或小鼠B细胞的ED50通常 < 1.0 ng/mL。
注意事项
1. 本品仅供科研使用,不得用于临床诊断、治疗或人体使用。
2. 操作时请穿着实验服,佩戴手套,遵守实验室生物安全规范。
3. 避免反复冻融。反复冻融超过3次可能导致蛋白活性显著下降。
4. 请在无菌条件下操作,以防微生物污染。
5. 稀释后的蛋白溶液应在当日使用完毕,不宜长期保存。
6. 请勿使用涡旋振荡器剧烈混匀蛋白溶液,应轻柔吹打或翻转混匀。
7. 在设计和解释实验时,请注意BAFF的多受体(BAFF-R、BCMA、TACI)特性及其可能引发的复杂生物学效应。
常见问题解答
Q1: 为什么我的实验结果不理想,细胞反应弱?
A: 可能的原因有:
细胞状态不佳: 确保使用的B细胞活力和纯度较高。
工作浓度不当: 建议进行梯度稀释,绘制完整的剂量效应曲线以确定最佳浓度。
蛋白活性丧失: 检查是否反复冻融次数过多,或解冻/储存条件不当。
实验体系问题: B细胞的完全激活可能需要其他信号协同(如抗IgM、CD40L等),请检查您的培养体系。
Q2: 60聚体BAFF和三聚体BAFF的主要区别是什么?
A: 主要区别在于活性和结构。60聚体BAFF通过形成类似“超聚体”的结构,能更有效地交联和激活细胞膜上的BAFF受体,从而将信号放大数百倍。在同等摩尔浓度下,60聚体诱导的生物学效应(如增殖、抗体产生)远强于三聚体。
Q3: 我应该如何选择合适的载体蛋白进行稀释?
A: 0.1% BSA 是通用且安全的选择。如果您的细胞培养体系对BSA敏感,或者后续实验(如体内注射)有要求,可以使用无动物源成分的HSA或专用的细胞因子稀释液。确保您选择的载体蛋白不会与您的实验系统发生交叉反应。
Q4: 这个产品可以用于体内动物实验吗?
A: 本品具有高生物活性,理论上可以用于小鼠等动物模型来研究BAFF过表达对免疫系统的影响(如诱导自身免疫病模型)。但请务必在操作前确认您的实验方案符合动物伦理要求,并选择适当的给药途径和剂量。建议起始剂量通过文献调研和预实验确定。
Q5: 如何检测蛋白的浓度和纯度?
A: 我们通过BCA法测定蛋白浓度,并通过SDS-PAGE(考马斯亮蓝染色)和SEC-HPLC(分子排阻色谱)来严格评估其纯度和聚合状态。您收到的产品附有详细的质量控制分析证书。
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。