预染蛋白Ladder(10-180kDa)，LK-6360

产品介绍  

本产品为预染色的宽范围蛋白质分子量标准品，包含 180, 135, 100, 75（红色）, 65, 45, 35, 25（绿色）, 15, 10 kDa 共10条清晰条带，适用于 SDS-PAGE 电泳过程中实时监测蛋白分离状态及判断目的蛋白分子量。预染蛋白条带在电泳过程中可直接观察，便于判断电泳进程和转膜效率。

产品特点  

1. 高分辨率与宽覆盖范围：覆盖10-180 kDa范围，适合多数常规蛋白检测。

2. 双色预染标记：

   - 75 kDa 条带为红色，作为电泳进程的显著视觉标记。

   - 25 kDa 条带为绿色，便于转膜时判断转印效率。

3. 即用型：可直接上样，无需加热或稀释。

4. 稳定性强：-20℃可长期保存，反复冻融3-5次不影响效果。

5. 兼容性广：适用于 Tris-Glycine 或 Bis-Tris 系统，与常规 Western Blot 流程兼容。

使用方法（仅供参考）  

 电泳步骤

1. 准备：从-20℃取出预染蛋白Ladder，轻轻摇匀，置于冰上或室温短暂融化。

2. 上样：取 5-10 μL 直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔中（根据凝胶厚度和加样孔大小调整）。

3. 电泳：按常规条件进行电泳（推荐初始电压80V，进入分离胶后调至120V）。

4. 观察：电泳过程中可实时观察彩色条带分离情况，当红色条带（75 kDa）接近凝胶底部时，可考虑停止电泳。

5. 后续应用：电泳结束后可直接进行考马斯亮蓝染色、银染或 Western Blot 转膜。

Western Blot 参考

- 预染条带在转膜后可于膜上直接观察，尤其是绿色条带（25 kDa）可辅助判断转膜效率。

- 注意：预染蛋白条带可能会在免疫检测过程中显色，建议避开目标蛋白区域剪膜。

注意事项  

1. 保存与运输：-20℃保存；运输过程中需使用干冰或冰袋。

2. 避免反复冻融：建议分装保存，避免超过5次冻融循环，否则可能导致条带模糊或降解。

3. 上样量：根据凝胶厚度和检测方法调整，过多上样可能导致条带过宽或拖尾。

4. 染色干扰：若进行 Western Blot，预染条带可能会与化学发光信号重叠，建议根据目标蛋白分子量合理选择 marker 或使用未预染 marker 作为对照。

5. 电泳缓冲液：推荐使用新鲜配制的电泳缓冲液，避免pH变化影响迁移准确性。

6. 安全性：本品含有少量 SDS，操作时请佩戴手套。  

常见问题解答  

Q1：预染蛋白Ladder 条带不清晰或拖尾？  

A：可能原因包括：① 上样量过大；② 凝胶电泳时间过长或电压过高；③ 样品反复冻融或保存不当；④ 电泳缓冲液重复使用次数过多。建议调整上样量、使用新鲜缓冲液并优化电泳条件。

Q2：转膜后看不到预染条带？  

A：请检查：① 转膜条件是否合适（时间、电流/电压）；② 膜类型是否匹配（NC膜或PVDF膜需充分活化）；③ 转膜后可用丽春红染色确认转膜效率。

Q3：预染条带分子量与预期不符？  

A：预染蛋白的迁移速度可能因凝胶体系、缓冲液 pH、电泳条件等略有差异，建议在同一块凝胶内比对目标蛋白。对于精确分子量确定，推荐结合未预染蛋白 marker 使用。

Q4：可用于非变性电泳吗？  

A：本产品为 SDS变性预染 marker，不推荐用于非变性（Native）PAGE。

Q5：预染条带会影响 Western Blot 曝光吗？  

A：可能会在化学发光时产生微弱信号，建议剪膜时避开 marker 所在区域，或使用未预染 marker 作为分子量参考。

Q6：产品有效期多久？  

A：-20℃避光保存条件下，有效期为 24个月。  

产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。

本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。